Human Th17 Flow Kit    只需一步即可完成Th17细胞的检测

Th17细胞为CD4＋的T细胞群，能够分泌 IL-17, IL-17F和IL-22。Th17细胞参与皮肤的免疫调节。如果调节失控，通常会引发牛皮癣，硬化症，狼疮，风湿性关节炎，肠炎等疾病。Biolegend 最新推出的human Th17 flow kit 能够一步完成混合细胞中胞内因子的染色，通过流式直接分析Th17细胞，简单快捷。

Biolegend Human Th17 Flow Kit组成： 

1. Mouse IgG1,k isotype control Alexa Fluor® 647/CD3 FITC/CD4 PE，25 tests

2. Anti-human IL-17 Alexa Fuor® 647/CD3 FITC/CD4 PE，25 tests

3. Fixation Buffer, 100ml

4. Permeabilization Wash Buffer (10X), 100 ml 

注：不包括Cell Staining Buffer

实验步骤： 

1. 每管收集0.5-1 X 10⁶/100 µl细胞。

2. 加入 0.5 ml Fixation Buffer ，充分混匀，室温放置20分钟

3. 350 g 离心5 分钟， 弃上清。

4. 准备1X Permeabilization Wash Buffer（ 10X Permeabilization Wash Buffer用无菌水稀释）。

5. 加入 2ml 1X Permeabilization Wash Buffer，混匀，室温放置20分钟后，350 g 离心5 分钟。

6. 加入 2ml 1X Permeabilization Wash Buffer 洗涤，350 g 离心5 分钟，弃上清。

7. 加入 100 µl of 1X Permeabilization Wash Buffer重悬细胞。

8. 加入 20 µl Alexa Fluor® 647 mouse IgG1, k isotype control/CD3 FITC/CD4 PE or IL-17 Alexa Fluor® 647/CD3 FITC/CD4 PE，室温避光孵育30分钟。

9.  用2ml 1X Permeabilization Wash Buffer洗涤两次，再用0.5ml cell staining buffer 重悬，上流式分析。